【48812】保藏！ 15张动图让你秒懂色谱原理！_行业新闻

时间: 2024-06-12 02:09:34 | 作者: 行业新闻

（chromatography）是分析测验物质理化性质的常用的有用手法，多用于生物分子及高聚物的别离检测等。

色谱包括多种操作办法不一样但原理相同的别离、分析技能。按其活动相和固定相状况不同分为气相色谱和液相色谱。

以气相色谱仪为例，首要由三大部分构成：载气、色谱柱、检测器。每一模块具体工作流程如下。

体积排阻色谱法（SEC）是运用多孔凝胶固定相的共同特性，首要是依据分子尺度巨细的差异来进行别离的办法，样品分子与固定相之间不存在彼此作用。

依据所用凝胶的性质，可大致分为运用水溶液的凝胶过滤色谱法（GFC）和运用有机溶剂的凝胶浸透色谱法（GPC）。

原理：色谱固定相是多孔性凝胶，只要直径小于孔径的组分能进入凝胶孔道。大组分不能进入凝胶孔洞而被排阻，只能沿着凝胶粒子之间的空地经过，因此最大的组分最早被洗提出来。

小组分可进入大部分凝胶孔洞，在色谱柱中停留时间长，会更慢被洗提出来。溶剂分子因体积最小，可进入一切凝胶孔洞，因此是终究从色谱柱中洗提出。这也是与其他色谱法最大的不同。

体积排阻色谱法适用于对不知道样品的探究别离。凝胶过滤色谱适于分析水溶液中的多肽、蛋白质、生物酶等生物分子；凝胶浸透色谱大多数都用在高聚物（如聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯）的分子量测定。

离子交换色谱是运用被别离组分与固定相之间产生离子交换的能力差异来完成组分别离。

原理：固定相为离子交换树脂，树脂分子结构中存在许多能够电离的活性中心。活动相最常运用水缓冲溶液，也有有机溶剂如甲醇，或乙醇同水混合。

活动相带着样品组分电离生成的离子经过固定相时，待别离组分中的离子与树脂分子结构中可电离的活性中心产生离子交换，构成离子交换平衡，从而在活动相与固定相之间构成分配。

固定相的固有离子与待别离组分中的离子之间彼此抢夺固定相中的离子交换中心，并跟着活动相的运动而运动，终究完成别离。

亲和色谱法是运用与固定相不同程度的可逆结合的亲和性，使成分与杂质别离的色谱法。固定相为彼此间具有高度特异亲和性的二种物质之一。

不同分子与固定相间亲和力巨细有差异，挑选恰当的洗脱条件便可将混合物中的组分逐一洗脱下来，到达别离纯化的意图。

首要用于别离活体高分子物质、过滤性病毒及细胞。长处是操作简略快捷、效率高、条件温文，缺陷是运用局限性大。

相对分子质量在200～2000的化合物，可用液-液分配色谱仪、液-固吸附色谱仪和离子交换色谱仪分析。

含有离子型或可离子化的化合物，或许能与离子型化合物彼此作用的化合物（如配位体和有机螯合剂），可首要考虑用离子交换色谱仪，或液-液分配色谱仪和凝胶色谱仪。